ORC4変異マウスを用いた個体レベルでの細胞周期研究

• 資料種別: 図書
• タイトル: ORC4変異マウスを用いた個体レベルでの細胞周期研究
• 著者・編者: 浅野, 雅秀; Asano, Masahide
• 著者標目: 浅野, 雅秀; Asano, Masahide
• 出版年月日等: 2016-04-21
• 出版年（W3CDTF）: 2016-04-21
• タイトル（掲載誌）: 平成16(2004)年度 科学研究費補助金 萌芽研究 研究概要 = 2004 Research Project Summary
• 巻号年月日等（掲載誌）: 2003 – 2004
• 掲載巻: 2003 – 2004
• 掲載ページ: 1p.-
• 本文の言語コード: jpn
• 件名標目: 複製開始点認識複合体; Orc4; トランスジェニックマウス; 胚性幹細胞; DNA複製; 細胞周期; 遺伝子トラップ
• 対象利用者: 一般
• 一般注記: 出版タイプ： AM; 金沢大学学際科学実験センター; 昨年までにOrigin Recognition Complex (ORC)を構成するサブユニットの1つであるOrc4変異マウスが胎生4.5日目以降にアポトーシスを起こして致死となることを明らかにしたが、今年度はホモ変異胚をレスキューするためにloxP配列で挟んだOrc4遺伝子を導入したトランスジェニック(Tg)マウスの作出を行った。Orc4 cDNAをloxP配列で挟み、マーカー遺伝子としてInternal Ribosomal Entry Siteの制御下にGFPが発現するようにしたOrc4-GFPベクターを作製した。プロモーターにはCAGプロモーターとPGKプロモーターを用いた。まず、HeLa細胞およびNIH3T3細胞に導入して、GFPが発現することを確認した。次に、PGKプロモーター制御下にOrc4が発現するベクターを用いてTgマウスの作出を試みた結果、現在のところ2系統のTgマウスの作出に成功したが、内在性Orc4遺伝子のホモ変異マウスをレスキューするものは得られなかった。導入遺伝子由来のOrc4の発現を成体の臓器別に調べた結果、脳、小腸、筋肉、胸腺、脾臓、精巣では強い発現が確認できたが、心臓、肺、肝臓では弱い発現しか認められず、腎臓ではほとんど発現が認められなかった。内在性のOrc4はこれらの臓器においてほぼ同じレベルで発現していることから、ホモ変異マウスが生存できないのは導入遺伝子の発現が弱いためと考えられた。そこで、さらにTgマウスを作成すると共に、初期胚では導入遺伝子由来のOrc4の発現が十分であり、胚性幹細胞が樹立できる可能性があるので、ホモ変異胚の内部細胞塊培養を試みているところである。Orc4ホモ変異胚性幹細胞が樹立できれば、Creの発現によりOrc4を人為的に欠損させて、細胞周期やDNA複製におけるOrc4の役割を詳細に解析することができる。; 研究課題/領域番号:15657045, 研究期間(年度):2003 – 2004; 出典：「ORC4変異マウスを用いた個体レベルでの細胞周期研究」研究成果報告書 課題番号15657045（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15657045/)を加工して作成
• DOI: 10.24517/00060442; https://doi.org/10.24517/00060442
• 著作権情報: CC BY-NC-ND
• 関連情報: https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=50251450; https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15657045/
• 連携機関・データベース: 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）; https://irdb.nii.ac.jp
• 提供元機関・データベース: 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA