並列タイトル等Screening for candidate genes involves in essential hypertension
タイトル（掲載誌）平成11(1999)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書概要 = 1999 Fiscal Year Final Research Report Summary
一般注記金沢大学医学部
日本人の高血圧症の90%は未だ原因の明らかでない本態性高血圧症に分類される。本研究は、本態性高血圧症の発症・進展に関わる遺伝素因の実体を明らかにするためのアプローチとして、本症モデル動物の血管で発現異常を示す遺伝子を分離し、その構造と機能を明らかにすることを目的とする。1.ヒト本態性高血圧症のモデル動物である自然発症高血圧ラット(spontaneously hypertensive rat、以下SHR)、その重症型であるSHR-SP(SHR-stroke prone)および正常親株(WKY)の大動脈よりRNAを分離し、蛍光ディファレンシャルディスプレイ法によりSHRおよびSHR-SPで発現増大もしくは低下を示すmRNA分子種の候補を複数種検出した。2.RT-PCR法により、それらに対応するcDNA断片を分離し、これらをプローブとして3種のラットの動脈より分離したRNAを用いてノーザン解析を行ない、1種のmRNAがSHRとSHR-SPの動脈で発現上昇をきたしていることを確認した。3.同定したmRNAに対する全長cDNAをrapid amplification of cDNA ends(RACE)法により分離し、塩基配列を決定した結果、当該mRNAはcyr61のラットホモログであることが明らかとなった。4.cyr61遺伝子の高血圧症発症過程での発現をNorthern法により解析した結果、cyr61 mRNAの大動脈での発現量比はWKY:SHR:SHRSP=1:2.7:3.7(4週齢)、1:2:1.8(6週齢)、1:1.2:1.6(12週齢)であり、cyr61 mRNAはWKYと血圧差の殆どない4週齢から既にSHR、SHRSP大動脈で発現が上昇することが明らかとなった。5.In situ hybridizationの結果、cyr61の発現上昇は大動脈平滑筋細胞での過剰発現のためであった。6.各組織由来のRNAを用いたNorthern blot解析の結果、cyr61 mRNAは大動脈でもっとも強い発現が認められ、心臓がそれに続いた。7.FISH法により、cyr61はラット第1番染色体長腕12-13領域にマップされ、これは従来報告されている高血圧関連QTL(quantitative trait loci)の何れにも属さなかった。
For the study of essential hypertension, spontaneously hypertensive rats (SHR) and stroke-prone spontaneously hypertensive rats (SHRSP) have proven to be valuable models. In the present study, we applied a fluorescent differential display method to mRNAs from aortae of SHR, SHRSP and their parental strain, Wistar Kyoto rats (WKY) towards identifying the genes involved in the development of the hypertension, and came across a gene which is consistently upregulated in the hypertensive rats. Nucleotide sequence determination of the corresponding cDNA revealed that the gene is the rat orthologue of cyr61. Northern blot analysis showed that cyr61 expression increases in SHR and SHRSP before the onset of hypertension, and is sustained thereafter at higher levels than in age-matched WKY. In situ hybridization analysis demonstrated that cyr61 is expressed strongly in smooth muscle cells in media, and faintly in fibroblasts in adventitia, of the hypertensive rat aorta, while in WKY the expression is only in fibroblasts. Fluorescent in situ hybridization mapped the cyr61 gene to rat chromosome 1p12-13, which has not been previously reported as a quantitative trait locus for blood pressure regulation. These results suggest that cyr61 is an additional factor which may be involved in the development of systemic hypertension.
研究課題/領域番号:10670010, 研究期間(年度):1998 – 1999
出典：「本態性高血圧症因候補遺伝子の探索」研究成果報告書 課題番号10670010（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-10670116/106701161999kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作成
一次資料へのリンクURLhttps://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=57776&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
関連情報https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=80240373
https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-10670116/
https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-10670116/106701161999kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
連携機関・データベース国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）