並列タイトル等Development of synthetic surfactant and its protective effect on alveolar type II cell
タイトル(掲載誌)平成16(2004)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書概要 = 2004 Fiscal Year Final Research Report Summary
一般注記金沢大学医薬保健研究域医学系
(1)合成サーファクタントの開発:pET80vectorに合成遺伝子を組み込んでSP-C類似蛋白の発現を試みたが収量は極めて少なかった.このため,合成遺伝子を切り出してpQE40に組み込んでDHPPとの融合蛋白として,つぎにpET32aに組み込んでThioredoxinとの融合蛋白として発現を試みた.しかし両者ともに蛋白の発現は認められなかった.合成蛋白の毒性が高いため蛋白を発現しない大腸菌が選抜されることが原因と考えられた.このためSP-C類似蛋白の合成を断念した.(2)高二酸化炭素ガスの肺胞II型上皮細胞保護作用:高二酸化炭素ガス下の肺胞II型上皮細胞の培養はIL-1の刺激による培養液中の炎症性サイトカインの上昇を蛋白レベルで抑制したが,mRNAの量に有意差を認めなかった.高二酸化炭素によるTNFの低下は転写後の変化によるものと考えられた.(3)肺虚血再灌流障害に対するニコチンアミドの効果:肺門部を90分間クランプしたのちに開放して虚血再灌流障害を惹起したラットの動脈血酸素分圧は再灌流後1時間で100mmHg前後であった.一方,ニコチンアミド100mg/kgを投与したラットでは290±80(SD)mmHgに有意に改善した.肺虚血再灌流障害の治療にニコチンアミドが有効と考えられた.(4)サーファクタント阻害による肺組織像の変化の解析:サーファクタントの機能障害がある状態で人工呼吸を行うことにより,小さい肺胞は虚脱し,大きい肺胞には過伸展がおきて肺の組織像が悪化することを発見した.換気量だけで呼吸状態を評価すると肺組織の傷害を見過ごす可能性がある.
(1)Development of a synthetic surfactant protein. A synthetic peptide mimicking surfactant protein-C (Sp-C) was expressed in E.coli, by using pET80 vector and synthetic DNA. However, the yield of synthetic peptide was extremely low. Next, we tried to express the synthetic peptide as fusion proteins fused with DHPP protein using pQE40 vector and with tluoredoxin using pET32a. However, the yields were low in both cases. The low yield is thought to be because of high toxicity of the synthetic peptide to E.coli. So, we could not succeed in expressing synthetic peptide.(2)Protective of effect of hypercapnia. High concentration of carbon dioxide (suppressed the increase of TNF released from alveolar type II cell stimulated by IL-1 under cell culture. The levels of mRNA for inflammatory cytokine were not elevated. So, high concentration of carbon dioxide inhibits TNF release at the post-transcription level.(3)Effect of nicotine amide of lung ischemia rperfuusion injury. The left lung of adult rats was reperfirsed after 90 min of ischemia. The arterial oxygen pressure of rats given nicotinamide was 290±80 (SD) mmHg and was significantly higher than that of the control rat (about 100 mmHg). Nicotine amide significantly reduced the lung ischemia reperfusion injury.(4)Analysis of the lung expansion after surfactant impairment. Mechanical ventilation of immature newborn rabbits treated with surfactant mixed with serum causes the collapse of small alveoli and the overexpansion of large alveoli. However, this surfactant increased the tidal volume to the same extent as normal surfactant. Normal tidal volume dose not necessarily mean normal surfactant function and may lead to overlooking impaired surfactant function.
研究課題/領域番号:15591621, 研究期間(年度):2003 – 2004
出典:「合成サーファクタントの開発と肺胞II型上皮細胞に対する保護作用の検討」研究成果報告書 課題番号15591621(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))(https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-15591621/155916212004kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成
一次資料へのリンクURLhttps://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=56884&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
関連情報https://nrid.nii.ac.jp/ja/search/?kw=30242556
https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15591621/
https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-15591621/155916212004kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
連携機関・データベース国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース(IRDB)(機関リポジトリ)