並列タイトル等Generation mechanisms of nitrogen dioxide-like species from cardiovascular system.
タイトル（掲載誌）平成16(2004)年度 科学研究費補助金 基盤研究(B) 研究成果報告書概要 = 2004 Fiscal Year Final Research Report Summary
一般注記金沢大学医学系研究科
我々は、ラット心臓中にペルオキシダーゼ依存性チロシンニトロ化を発生させる酵素又は蛋白質の存在を、生化学的及び免疫組織学的に検討した。チロシンニトロ化の関与する蛋白質は、可溶性分画で、pH6.0で最大の活性を示した。ヒドキシアパタイト、イオン交換クロマトグラフィー等による精製により、ヘモグロビンおよびミオグロビンが関与していることが判明した。その他の蛋白質の存在も認められたが、同定にまで至らなかった。モルカット膜を用いた検討により、ミオグロビンやチトクロームcは、この目的蛋白質に関係ないことが判明した。更に、凍結切片を用い、過酸化水素、亜硝酸イオン下で反応させると、ニトロチロシン抗体に反応する染色局在を、心筋細胞に認めた。下腿横紋筋では、このような染色が認められないことより、ミオグロビンではないことが判明した。さらに、虚血-再還流により作製した心筋梗塞の凍結切片を用いチロシンニトロ化に関与する酵素の存在を検討すると、冠動脈に集積する好中球由来のペルオキシダーゼが関与することが判明した。しかしながら、固定標本及び未処理凍結切片では、梗塞部の染色局在を認めるが、冠動脈での染色は認められなかった。以上より、ヘモグロビン、ミオグロビン、チトクロームC以外にチトクロームCの分解物であるミクロペルオキシダーゼも考えられるが、分子量から否定的であり、今後、高分子量のタンパクの検討が必要である。
We investigated whether some enzymes or proteins contribute to peroxidase-dependent tyrosine nitration are existed in the heart and what biochemical characteristics are contained in the peroxidases. Proteins contribute to tyrosine nitration are demonstrated in soluble fractions of rat's heart and showed a maximal tyrosine nitration capacity in pH 6.0 and were determined as hemoglobin and myoglobin. When cryosections of rat's heart were incubated in the presence of low concentrations of N02- and H202, immunohistochemical localization for nitrotyrosine was observed in a granular pattern in the myocytes. Moreover, we investigated the existence of peroxidase proteins contribute in tyrosine nitration in an ischemic heart or infracted lesions of the heart after isechemia reperfusion. Peroxidase-dependent tyrosine nitration capacity was observed in the coronary artery and determined as myeloperoxidase from neutrophils. However, immunostaining localization for nitrotyrosine was observed in infarcted lesions and not in the coronary artery of fixed heart sections or cryosections of the heart. Therefore, after removal of hemoglobin and myoblobin, although it is speculated that microperoxidases from the decomposition of cytochrome c may contribute to the tyrosine nitration of myocytes, it is not likely to consider it because of molecular weight of contributed proteins. In future, high molecular weight proteins should be investigated.
研究課題/領域番号:14370120, 研究期間(年度):2002 – 2004
出典：「二酸化窒素様活性窒素種の心血管系組織からの発生機序とその制御に関する研究」研究成果報告書 課題番号14370120（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-14370120/143701202004kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成
関連情報https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=70204104
https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-14370120/
https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-14370120/143701202004kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
連携機関・データベース国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）