タイトル(掲載誌)平成10(1998)年度 科学研究費補助金 奨励研究(A) 研究概要 = 1998 Research Project Summary
一般注記金沢大学医薬保健研究域医学系
mRNAおよび蛋白レベルにおけるret proto-oncogeneの発現を、in vivoおよびin vitroについて検討した.以下にこれまでの実験の概要と結果を示す.1.すでに報告されているマウスret proto-oncogene cDNA sequenceをもとに,1組のプライマーセット,センス鎖(283-303bp)とアンチセンス鎖(1243-1263bp),を作成した.2.成体マウスから大脳,脊髄,胎盤を採取し,これらからIsogen法によりtotal RNAを抽出した.3.合成プライマーと抽出したRNAから、RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)法によりin vivoにおけるret mRNAの発現を検討した.目的とする981bp cDNA断片の発現は,脊髄のみに観察された.4.培養マウス神経芽細胞腫Neuro-2aから細胞総蛋白質とIsogen法によりtotal RNAを抽出した.5.合成プライマーと抽出RNAを用いたRT-PCR法により,目的とする981bp cDNA断片を増幅し,Neuro-2aにret mRNAの発現を確認した.6.Neuro-2aより抽出した細胞蛋白質をSDS-PAGE法にて分離し、マウスret蛋白(RET)と反応する抗体(Santa Cruz Biochemistry)を用いてWestern Blotting法を行った.本細胞中に抗RET抗体と交叉する単一の約120kDaのバンドを検出した.
研究課題/領域番号:09771036, 研究期間(年度):1997 – 1998
出典:「神経栄養因子GDNFとNOを介する脊髄運動ニューロンの分化,再生機構の解析」研究成果報告書 課題番号09771036(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所))(https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-09771036/)を加工して作成
関連情報https://kaken.nii.ac.jp/ja/search/?kw=40283113
https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-09771036/
連携機関・データベース国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース(IRDB)(機関リポジトリ)