並列タイトル等Elucidation of internal generation of new nitrogen dioxide-like species and its defense mechanisms.
タイトル（掲載誌）平成13(2001)年度 科学研究費補助金 基盤研究(A) 研究成果報告書概要 = 2001 Fiscal Year Final Research Report Summary
一般注記金沢大学医薬保健研究域医学系
好酸球ペルオキシダーゼによる活性窒素種産生に伴うアミノ酸及び蛋白質アミノ酸のチロシンニトロ化の基礎的検討と病態生理学的意義を、好酸球を中心にヒト好酸球由来白血病細胞株やアトピー性皮膚炎発症NC/Ngaマウスを用いて検討した。免疫組織学的方法論に関して、固定法により好酸球が抗ニトロチロシン抗体陽性になることがわかり、好酸球の浸潤の見られる組織の固定法には十分注意する必要があることが判明した。この基礎的検討より、アトピー性皮膚炎発症NC/Ngaマウスにおける、アトピー性皮膚炎発症時に、皮膚組織に浸潤する好酸球にニトロチロシン陽性細胞が多くなることや、好酸球は、多の細胞から産生された活性窒素種により容易にニトロ化されやすいことも判明した。好酸球は種々の活性窒素種を消去する防御的役割を有している可能性が考えられた。また、ヒト好酸球由来白血病細胞株(Eol-1)を用いて、ブチル酸分化誘導後、H202とNO2-添加によるニトロチロシン生成能を検討した結果、誘導されたのは好酸球ペルオキシダーゼでなくミエロペルオキシダーゼであることを確認した。さらに、ラット臓器においてチロシンニトロ化能を有するペルオキシダーゼ酵素の分布を検討した結果、消化管に存在する好酸球ペルオキシダーゼ由来のものと肺、脾臓、心臓に由来する未知のペルオキシダーゼに分かれた。そのうち心臓では、ヘモグロビンとミオグロビン以外にも心筋細胞にチロシンニトロ化能を有するペルオキシダーゼ様未知の酵素又はヘム蛋白が存在することが分かった。
The pathophysiological significance of free-tyrosine or protein-bound tyrosine nitration by the generation of reactive nitrogen species via eosinophil peroxidase was investigated with eosinophils, eosinophil-derived leukemia cells or atopic dermatitis- like-NC/Nga mice. Regarding the immunohistochemical staining method, artifact were occasionally observed in sections containing eosinophils. As a result of this research, an increase in the immunostaining cells for nitrotyrosine in eosinophils of atopic dermatitis-like lesions in NC/Nga mice and the susceptibility of nitrotyrosine staining in eosinophils by reactive nitrogen species derived from adjacent cells were demonstrated. Therefore, it was speculated that eosinophils have a role in the scavenging of reactive nitrogen species. We demonstrated that the expression of myeloperoxidase in human eosinophilic leukemia cell line (Eol-1) occurred when the cells were degenerated by butyric acid and when the ability of nitrotyrosine formation was detected after cytospin preparations of the cells with H_20_2 and NO_2 contrary to the expectation of eosinophil peroxidase expression. Moreover, in further investigations into the localization of peroxidase responsible for the nitration of tyrosine in rat organs, two peroxidases were recognized. One is eosinophil peroxidase found in the gastrointestinal tract and the other is an unknown peroxidase -like that found in the lungs, spleen and heart. In the heart, an unknown peroxidase-like enzymes or the heme protein contributed for the nitration of tyrosine was localized in myocytes.
研究課題/領域番号:11307006, 研究期間(年度):1999 – 2001
出典：「新しい二酸化窒素反応性窒素様種の生体内発生とその防御機構の解明」研究成果報告書 課題番号11307006（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-11307006/113070062001kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作成
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