並列タイトル等Analysis on hormonal receptors in appendage tumors of skin
タイトル(掲載誌)平成13(2001)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書概要 = 2001 Fiscal Year Final Research Report Summary
一般注記金沢大学附属病院
表皮培養細胞・メラノサイト・線維芽細胞および乳房外パジェット病を含む各種皮膚腫瘍の凍結組織からRNAを抽出した。抽出したRNAから逆転者反応でcDNAを作製し、PCR反応を用いてメラノコルチン5レセプター(MC5-R)mRNAの発現を検討した。その結果、正常表皮および一部の悪性黒色腫・乳房外パジェツト病の腫瘍細胞がMC5-R mRNAを発現していることを明らかにした。また、乳房外パジェット病のリンパ節転移からアンドロゲンレセプター(AR) mRNAを発現していることを示した。また、各種皮膚腫瘍をMC5-RおよびARに対する抗体を用いて免疫染色したところ、乳房外パジェット病の腫瘍細胞がMC5-R蛋白を強く発現していること、正常皮膚の外分泌腺および乳房外パジェット病の腫瘍細胞がARを発現していることを明らかにし。た。次いで各種皮膚疾患皮膚のパラフイン包埋組織からmicro dissection法により腺組織のみを分離し、フェノールクロロフォルム法でDNAを精製・抽出した。メラノコルチン5レセプター(MC5-R)のコーディング領域を特異プライマーによりPCR反応で増幅し、ダイレクトシーケンスにより変異の有無を解析したところ、Phc209Leuが各種サンプルから検出されたが、コントロールにも同様の変異が検出されたので、polymorphismと考えられた。
We have studied melanocortin 5 (MC5) and androgen receptors (AR) expression in skin, and allelic variation at the MC5-R and AR locus in diverse human populations and candidate disease groups including extra-mammary P get's disease (EMPD). MC5-R mRNA and protein were detected in normal skin including the sweat glands, tumor cells of EMPD as well as low level expression in the interfollicular epidermis by RT-PCR and immunohistochemistry. Eighty percent cases of EMPD variably expressed nuclear AR protein. Expression of AR mRNA was confirmed by RT-PCR.Sequencing of the entire the MC5-R coding region in a range of human populations revealed 1 non-synonymous (F209L) and 4 synonymous changes (ASIA, D108D, S125S, and T248T). No additional mutations were found in patients with acne (n=21), hidradenitis supprativa (n=4) and in sebaceous gland lesions comprising sebaceous nevi, adenomas and hyperplasia (n=13). The variant MC5-R was shown to act in a dose dependent manner to a-MSH stimulation, which did not differ from that of wild type using CAMP assay. We have therefore found no evidence of a causative role for MC5-R in sebaceous gland dysfunction, and in the absence of any association between variation at the locus and disease group, the pathophsyiological role of the MC5-R receptor in man requires further study.Direct sequencing of exon 2 through exon 8 of AR revealed to mutation in any of 10 tumor samples from advanced stage of EMPD. The present findings showing frequent expression of structurally unaltered AR in an advanced stage of EMPD may provide a rational basis for hormone therapy.
研究課題/領域番号:12670811, 研究期間(年度):2000-2001
出典:研究課題「皮膚附属器腫瘍におけるホルモンレセプターの解析」課題番号12670811(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所)) (https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-12670811/126708112001kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成
一次資料へのリンクURLhttps://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=50595&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
関連情報https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=30272959
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12670811/
https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-12670811/126708112001kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
連携機関・データベース国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース(IRDB)(機関リポジトリ)