並列タイトル等Bone mineralizing hormone <calcitonin> produced in cartilaginous fish : clarification of its physiological function in cellular level
タイトル（掲載誌）平成8(1996)年度 科学研究費補助金 基盤研究(A) 研究成果報告書概要 = 1996 Fiscal Year Final Research Report Summary
一般注記金沢大学理学部
本研究は平成7年度と8年度に渡って研究された。しかしながら、当初に目的とするところまでは、残念ながら達していない。これは7年度の配分が10月末日に補正予算として遅れて来たこと、その額が予定をした物品の購入にはるかに及ばない為、自分で装置の手作りから始めねばならなかったことによる。さらに、日本海における原油流出という全く不足の事態が発生して漁船が出ず、アカエイ等の軟骨魚類の入手がかなり困難になってしまったことも原因の一つである。現在、本研究で申請した細胞内イオン測定装置(日本分光:CAM230型)に相当する、細胞内のCa濃度の変化を調べる装置を、倒立顕微鏡と落射蛍光装置及び光電子倍増管を組み合わせて完成させた。これはニコンTMD300という倒立顕微鏡に蛍光カルシウム指示薬Indo-1用の落射蛍光装置(EF-S/Ca)を組み込み、細胞を380nmの波長でたたき、そこから出る蛍光をダイクロイックミラーDM455により2つの波長に分け、波長405と485のフィルターを通して細胞内Ca濃度の盛衰を見るという装置である。実際は、倒立顕微鏡のサイドポートへ光電子倍増管(浜松ホトニクスR1477)を2本組み込んだ装置を取り付け、2ペンのレコーダーへシグナルを導き、記録した。すなわちCa濃度が高いときは405nmのピークが高く、低いときは485nmのピークが高くなる。軟骨細胞の培養は試みてはいるが現在、上手く行かない。最近、神経細胞の細胞膜は軟骨細胞が生産する軟骨基質に似た硫酸プロテオグリカンからなるという報告がある。従って、上記の装置の有効性を試すため、軟体動物のアメフラシの腹部神経節より過去に、申請者らがカルシトニンに反応する事を見いだしたR9と名付けられている細胞で細胞内Ca濃度の変化を検出を試みた。しかしながら、うまく細胞内Caの変化を捕らえらず、その原因をやっきとなって調べている。
As we have clarified a primary structure of calcitonin from the stingray before, as a next step, the physiological function of this hormone was tried to study at a cellular level. This project was performed in 1995 and 1996. At present, however, the fruitful results are not yet obtained for some reasons. The main difficulty was to have to build up the instrument for determining cytoplasmic Ca level by ourselves, because financial support was fairly small when compared to the amount requested. Nevertheless, we made an instrument for the purpose by combining an inversed microscope (Nikon TMD 300) with an apparatus of epi-fluorescence for Indo-1 (Nikon EF-S/Ca) and 2 photo multipliers (Hamamatsu Photonics R1477). The principle of this instrument is following. When the cell is irradiated by a wave length 380 nm from a mercury lamp, the fluorescence must be released from the cell, because the cell is treated with Indo-1 already.The fluorescence is divided into two wave lengths of 405 nm and 485 nm by a dichroic mirror DM455. If Ca level in the cytoplasm is high, the peak of 405 nm should be high, and the Ca level is low, peak of 485 nm should be high. Such changes in the Ca level is recorded by a two-pen recorder. On the other hand, although we tried to cultivate chondrocyte from branchial cartilage of goldfish in vitro, but good results are not yet obtained. Recently, it was reported that cellular membrane of neurons is composed of the same component as the cartilaginous matrix of cartilage. Therefore, to check the performance of our instrument, we examined the cytoplasmic changes of Ca level in neurons from abdominal ganglion of Aplysia, as we have checked some of neurons can respond to calcitonin before. However, we could not detect Ca changes, when calcitonin was added to the incubation medium. At present, the causes are examined, whether the sensitivity of this instrument was low, or quantity of the administration of calcitonin was two much low.
研究課題/領域番号:07554089, 研究期間(年度):1995 – 1996
出典：研究課題「軟骨魚類の骨硬化ホルモン〈カルントニン〉: 細胞レベルにおける生理作用の解明」課題番号07554089（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07554089/）を加工して作成
一次資料へのリンクURLhttps://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=59963&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
関連情報https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=30018999
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07554089/
https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-07554089/075540891996kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
連携機関・データベース国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）