並列タイトル等The transcription factor of cyclin-dependent kinase 2 (cdk2) gene.
タイトル(掲載誌)平成7(1995)年度 科学研究費補助金 一般研究(C) 研究成果報告書概要 = 1995 Fiscal Year Final Research Report Summary
一般注記金沢大学薬学部
cdk2は細胞周期に依存して活性が変化することが知られている。cdk2mRNA量が細胞周期に依存して変動することを我々は見いだした。cdk2はG1/S期において増加しはじめ、S期で最大に達し、その後減少した。cdk2遺伝子は細胞周期に依存した転写調節を受けていると考えてその機構を解析することにし、マウスcdk2遺伝子の-419bから+68bの領域にcdk2遺伝子の細胞周期特異的な転写に必要な領域があることを見いだしている。更に細胞周期特異的な転写に必要な領域を細かく定めているところである。cdk2は転写調節以外に、翻訳後調節を受けることが知られており、我々はこの点についても検討を試みることにした。cdc2やcdk2のcdkファミリーはリン酸化や脱リン酸化を受け活性が変化することが知られているが、これに関与する酵素はについてはあまりよく分かっていない。そこでcdkファミリーをリン酸化する酵素の一つと考えられているマウスのwee1をクローニングしその活性について検討した。マウスwee1cDNAは2258bpで、646個のアミノ酸をコードしていた。このcDNAをエクスプレッションヴェクターへ組み込み、活性について検討したところ以下の重要な結論を得た。1)マウスWee1はN-末端のリン酸化を受け、不活性化される。2)マウスwee1はcdc2-サイクリンB複合体をリン酸化する。cdk2のリン酸化については現在検討中である。
cdk2 is a protein kinase and its activity changes during the cell cycle. It is postulated that this change of activity follows the change of transcription rate of the gene and post-translational modification. We found the mRNA of cdk2 begun to increase at G1/S and reached to the largest level at S-phase then declined thereafter. We showed that the transcription amount of cdk2 changed during the cell cycle. To determine the DNA region which involved in the cell-cycle dependent regulation of the gene, mouse cdk2 gene was cloned. And fragments from+68bp to various sites of 5'upstream region were subcloned, and luciferase reporters were prepared. These reporters were transfected into CHO cells, and stable transformants were obtained. After synchronization of the cell cycle of these stable transformants, the activities of luciferase were assayd. We showed that the region from +68bp to- 419bp was required for cell-cycle dependent expression of luciferase. We also studied the post-translational modification of cdk2. It is suggested that the activity of cdk family proteins changes with their phospyorylation and dephosphorylation, however, the kinase (s) and phosphatase (s) are not well understood. wee1 is postulated as the one of such kinases, and we cloned cDNA of mouse wee1. This clone consisted with 2258bp and its open reading frame corresponds to a 646 amino acid residues. This mouse wee1 clone was inserted into vaculovirus transfer vector, and studied on phosphorylation. The results obtained were 1) mouse wee1 was inactivated by a phosphorylation of an amino acid residue of N-terminal region of the protein, 2) mouse wee1 phosphorylated the cdc2 kinase. We study if mouse wee1 phosphorylates cdk2, as well.
研究課題/領域番号:06672176, 研究期間(年度):1994 – 1995
出典:研究課題「サイクリン依存性キナーゼ2(cdk2)遺伝子の転写調節因子」課題番号06672176(KAKEN:科学研究費助成事業データベース(国立情報学研究所)) (https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-06672176/066721761995kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成
一次資料へのリンクURLhttps://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=60183&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
関連情報https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=10012634
https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-06672176/
https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-06672176/066721761995kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
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