両生類胚へのmRNAの顕微注入法を活用したVent2-SKLとxR-Ras2の機能評価

Material type: 文書・図像類

Author: 佐藤, 友香

Publisher: 慶應義塾大学湘南藤沢学会

Publication date: 2013

Material Format: Digital

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Note (General)：: type:text両生類胚へのmRNAの顕微注入は特定の遺伝子の発生現象に対する機能評価を迅速且つ正確に行える最良の手法の一つである。本研究室では, 二量体形成型転写因子の核移行を阻害する手法として, C末端にペルオキシソーム移行シグナルであるSKL配列を追加することが考案されていたが, その十分な...

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Material Type: 文書・図像類
Title: 両生類胚へのmRNAの顕微注入法を活用したVent2-SKLとxR-Ras2の機能評価
Author/Editor: 佐藤, 友香
Author Heading: 佐藤, 友香
Publication, Distribution, etc.: 慶應義塾大学湘南藤沢学会
Publication Date: 2013
Publication Date (W3CDTF): 2013
Alternative Title: リョウセイルイハイエノ mRNA ノケンビチュウニュウホウオカツヨウシタ Vent2-SKL ト xR-Ras2 ノキノウヒョウカ
Ryoseirui hai eno mRNA no kenbi chunyuho o katsuyoshita Vent2-SKL to xR-Ras2 no kino hyoka
Periodical title: 生命と情報
No. or year of volume/issue: 20-2
Volume: 20-2
Pages: 1-13
Text Language Code: jpn
Subject Heading: SKL,Vent,顕微注入,R-Ras2,convergent extension
Target Audience: 一般
Note (General): type:text
両生類胚へのmRNAの顕微注入は特定の遺伝子の発生現象に対する機能評価を迅速且つ正確に行える最良の手法の一つである。本研究室では, 二量体形成型転写因子の核移行を阻害する手法として, C末端にペルオキシソーム移行シグナルであるSKL配列を追加することが考案されていたが, その十分な評価が行われていなかった。また, 胚の収斂伸長運動(CE : convergent extension)に関わる遺伝子のスクリーニングにおいて, 伸長に関わることが期待される遺伝子としてR-Ras2が得られていたが, その評価は行われていなかった。そこで私は, これらの評価研究に取り組むことにした。 SKL配列付加の有効性については, 原腸胚期の腹側領域において発現するVent2遺伝子を対象とした。まず, Vent2のC末端にSKLを付加したVent2-SKLをコードする遺伝子の全長を委託合成し, そこからSKL配列を取り除いたものも作成して, それぞれをmRNA合成に適したpCS2プラスミドにサブクローニングした。そして, そのmRNAを合成し顕微注入をしたところ, Vent2-SKLは本来のVentの働きを失っているだけでなく, 微弱ながらも背側化させることが判明した。 R-Ras2の機能評価については, 予め作成されていたR-Ras2とdominant negative型となるR-Ras2のそれぞれをコードする遺伝子が含まれたプラスミドからmRNAを合成し, それぞれをツメガエル胚に顕微注入した。その結果, どちらの場合においても, 胚の伸長に対して顕著な阻害を引き起こすことが確認された。以上の結果より, SKL付加による二量体転写因子の核移行阻害についてはその有効性が示唆された。そしてR-Ras2についてはCEに関わる新しい遺伝子であることが示されたと言える。
慶應義塾大学湘南藤沢キャンパス先端生命科学研究会 2013年度学生論文集卒業論文ダイジェスト
identifier:SFC-RM2013-005
identifier:請求記号: 090@KE1@179-20-2
Access Restrictions: 限定公開
Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 慶應義塾大学 : 慶應義塾大学学術情報リポジトリ