患者iPS細胞由来視細胞標識による網膜色素変性症疾患メカニズムの解析

Material type: 文書・図像類

Author: 本間, 耕平

Publisher: -

Publication date: 2018

Material Format: Digital

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Note (General)：: type:text本研究では，これまでに既に作製された網膜色素変性症 (RP) 患者由来iPS細胞 (RP1，RP9，PRPH2，RHOの変異株) を使用した。得られたRPのiPS細胞のラインのゲノムを抽出し遺伝子変異を確認した。これらのラインから分化させた桿体視細胞を選択的に標識するために、ゲノム...

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科研費研究者番号 : 80462729

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Material Type: 文書・図像類
Title: 患者iPS細胞由来視細胞標識による網膜色素変性症疾患メカニズムの解析
Author/Editor: 本間, 耕平
Author Heading: 本間, 耕平
Publication Date: 2018
Publication Date (W3CDTF): 2018
Alternative Title: カンジャ iPS サイボウユライシサイボウヒョウシキニヨルモウマクシキソヘンセイショウシッカンメカニズムノカイセキ
Kanja iPS saibō yurai shisaibō hyōshiki ni yoru mōmaku shikiso henseishō shikkan mekanizumu no kaiseki
Investigation of disease mechanisms by fluorescent labeling of photoreceptor derived from retinitis pigmentosa patient-derived induced pluripotent stem cells
Periodical title: 科学研究費補助金研究成果報告書
Text Language Code: jpn
eng
Subject Heading: ヒトiPS細胞,網膜色素変性症,ゲノム編集
Target Audience: 一般
Note (General): type:text
本研究では，これまでに既に作製された網膜色素変性症 (RP) 患者由来iPS細胞 (RP1，RP9，PRPH2，RHOの変異株) を使用した。得られたRPのiPS細胞のラインのゲノムを抽出し遺伝子変異を確認した。これらのラインから分化させた桿体視細胞を選択的に標識するために、ゲノム編集によるノックインを行った。これによりGFPの蛍光で分化した視細胞が確認できる。この視細胞に分化した細胞をGFPで標識することができ、その後の遺伝子発現、機能解析を行うことが可能となった。この技術を用いて分化した蛍光タンパク質標識視細胞を比較することによって疾患メカニズムやドラッグスクリーニングを検討することができる。 In this research, several human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) were used to investigate the disease mechanism of retinitis pigmentosa (RP). Genomic mutation of RP patient derived hiPSCs were confirmed by genomic PCR and conventional sequencing. Genome of these cell lines (and wild-type control hiPSCs) were edited with CRISPR-Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats / CRISPR associated proteins). In these cell lines, photoreceptor specific promoter GFP expression cassette were inserted in both alleles of AAVS1 sites, safe harbor for gene insertion, thus derived photoreceptors from these hiPSC lines were fluorescently labeled with GFP. By using these cell lines, the gene expressions and the cellular function could be investigated specifically in photoreceptors. These fluorescently labelled cells could be used for the investigation of disease mechanisms and the drug screening.
研究種目 : 基盤研究(C)(一般) 研究期間 : 2016～2018 課題番号 : 16K11305 研究分野 : 神経科学
Source: https://koara.lib.keio.ac.jp/xoonips/modules/xoonips/download.php?koara_id=KAKEN_16K11305seika
https://koara.lib.keio.ac.jp/xoonips/modules/xoonips/download.php?koara_id=KAKEN_16K11305seika
Access Restrictions: 限定公開
Related Material: 科研費研究者番号 : 80462729
Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 慶應義塾大学 : 慶應義塾大学学術情報リポジトリ