ドラッグ・リポジショニングによるフックス角膜変性症治療薬の開発

• Material Type: 文書・図像類
• Title: ドラッグ・リポジショニングによるフックス角膜変性症治療薬の開発
• Author/Editor: 榛村, 重人
• Author Heading: 榛村, 重人
• Publication, Distribution, etc.: 慶應義塾大学
• Publication Date: 2019
• Publication Date (W3CDTF): 2019
• Alternative Title: ドラッグ・リポジショニング ニ ヨル フックス カクマク ヘンセイショウ チリョウヤク ノ カイハツ; Doraggu ripojishoningu ni yoru Fukkusu kakumaku henseishō chiryōyaku no kaihatsu; Development of novel therapies for Fuch's endothelial dystrophy by drug repositioning
• Periodical title: 学事振興資金研究成果実績報告書
• Text Language Code: jpn; eng
• Target Audience: 一般
• Note (General): type:text; フックス角膜内皮変性症（FCD: Fuchs corneal dystrophy）は加齢とともに進行性に内皮細胞数の減少をきたし、水疱性角膜症をきたす疾患であるがその病態は不明な点が多い。本研究の目的はFCD患者由来iPS細胞から誘導した角膜内皮細胞を用いFCDのin vitro疾患モデルを確立し、病態解明や創薬開発を行うことである。 申請者は慶應義塾大学倫理委員会の承認のもとFCD患者4名(3名日本人、1名オランダ人)の末梢血単球からiPS細胞を樹立し、既報を改変した方法により一か月の培養期間を経て角膜内皮細胞を誘導した。得られたFCD患者由来角膜内皮細胞に対しqRT-PCRによる分化・小胞体ストレス・老化・代謝関連分子の解析を行った。また細胞死の指標となるCleaved caspase3 ,DNA損傷の指標となるγH2AXのfociについても免疫染色しin cell analyzerを用いて解析を行った。さらにFlux Analyzerを用いてミトコンドリアストレステストを行った。結果、FCD疾患由来角膜内皮細胞では酸化ストレス・小胞体ストレス・DNA damage response が障害されていることが明らかになった。またこれらをrescueする薬剤として新規候補薬を発見した。さらにDNAマイクロアレイによる多変量解析を行い、日本人株そしてオランダ人株のFCD疾患由来角膜内皮細胞においてに共通して上昇している遺伝子24・および共通して下降している遺伝子26を新規に同定した。 Fuchs corneal dystrophy (FCD) is a progressive disease of the corneal endothelium of unknown etiology. This investigation sought to derive induced pluripotent stem cells (iPS) from patients with Fuchs dystrophy, and to use these cells to investigate pathophysiology of the disease, as well as to develop new drugs for therapy. Following approval by the institutional review board, iPS cells were derived from the peripheral blood of 4 FCD patients (3 Japanese, 1 Dutch), and were differentiated into corneal endothelial cells. qRT-PCR was performed for markers of differentiation, ER stress, aging and cell metabolism. Immunocytochemistry was performed for cleaved caspase 3, gamma H2AX as markers of DNA damage, and data was imaged by in cell analyzer. Flux analyzer was used to measure mitochondrial stress. We found that FCD-derived endothelial cells were prone to oxidative stress, ER stress as well as DNA damage. We also found a drug candidate that may rescue cells from the disease phenotype. DNA microarray analysis also revealed that there were similarities and differences between the Japanese and Dutch iPSC lines, which may help elucidate the different mechanisms involved in the progression of disease.
• Access Restrictions: 限定公開
• Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）; https://irdb.nii.ac.jp
• Original Data Provider (Database): 慶應義塾大学 : 慶應義塾大学学術情報リポジトリ