心筋細胞におけるステロイドホルモン合成酵素の解明及びその病態生理学的意義

Material type: 文書・図像類

Author: 武田, 仁勇ほか

Publisher: 金沢大学附属病院先端医療開発センター

Publication date: 2009-03

Material Format: Digital

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Note (General)：: 1)ラット心筋におけるアルドステロン産生、及び合成酵素の存在の証明ラット心臓潅流標本を用いて潅流液中にアルドステロンの存在を高速液体クロマトグラフィ(HPLC)、ガスクロマトグラフー質量分析型(GC/MS)を用いて検討を行い,アルドステロンと同等の質量を有するステロイドの存在を確認した.次に心臓をホ...

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Material Type: 文書・図像類
Title: 心筋細胞におけるステロイドホルモン合成酵素の解明及びその病態生理学的意義
Author/Editor: 武田, 仁勇
Takeda, Yoshiyu
Author Heading: 武田, 仁勇
Takeda, Yoshiyu
Publication, Distribution, etc.: 金沢大学附属病院先端医療開発センター
Publication Date: 2009-03
Publication Date (W3CDTF): 2009-03
Alternative Title: Pathophysiological roles for cardiac steroid hormone biosynthesis
Periodical title: 平成12(2000)年度科学研究費補助金基盤研究(C) 研究成果報告書 = 2000 Fiscal Year Final Research Report
No. or year of volume/issue: 1999-2000
Volume: 1999-2000
Pages: 13p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: 心筋
メッセンジャーRNA
アルドステロン合成酵素
アルドステロン
心肥大
cardiomyocyte
messenger RNA
aldosterone synthase
aldosterone
cardiac hypertrophy
Target Audience: 一般
Note (General): 1)ラット心筋におけるアルドステロン産生、及び合成酵素の存在の証明ラット心臓潅流標本を用いて潅流液中にアルドステロンの存在を高速液体クロマトグラフィ(HPLC)、ガスクロマトグラフー質量分析型(GC/MS)を用いて検討を行い,アルドステロンと同等の質量を有するステロイドの存在を確認した.次に心臓をホモジナイズし、[^<14>C]-DOCを加え培養し、培養液をHPLCを用いて分離しアルドステロンの標準ピークに一致する分画を採取し放射活性を測定し、アルドステロンまで変換されるか検討を行なった.心筋におけるアルドステロン合成酵素メッセンジャーRNA(mRNA)の存在を証明するために,心筋からRNAを抽出し逆転写酵素で処置後、アルドステロン合成酵素遺伝子に特異的なプライマーを用いてPCRを行いmRNAの発現を検討した.心筋におけるアルドステロン合成酵素遺伝子mRNAの発現は副腎に比べて100分の1程度と弱かったが,検出可能であった.2)ラット心筋におけるアルドステロン合成調節機構の解明ラットにアンジオテンシン変換酵素阻害薬やアンジオテンシンIIを投与し、また副腎全摘ラットを作製し心臓からのアルドステロンの産生、及び心筋におけるアルドステロン合成酵素活性及びmRNAの発現に対する影響を検討した。心筋におけるアルドステロン合成は副腎同様アンジオテンシンII及びKにより調節をうけ,ACTHの影響は見られなかった.3)脳卒中易発症自然発症高血圧ラット(SHRSP)における検討心筋から産生されたアルドステロンがSHRSPの心肥大進展に及ぼす影響について検討した.心肥大との関連について検討すると,心筋からのアルドステロン産生,合成酵素活性,mRNAの発現は心肥大の進展とともに増加し,心肥大の病態に関与していることが示唆された.次に副腎からのアルドステロンの影響を除外するために,SHRSPの両側副腎摘出を行い,アルドステロン受容体拮抗薬であるスピロノラクトンを投与し心肥大の変化について検討した.両側副腎摘出SHRSPにおいても心肥大の進展がみられたが,スピロノラクトン投与により心肥大の進展は予防できた.これらのことより心筋から産生されるアルドステロンは心肥大の病因に一部関与していることがさらに示唆された.
Aldosterone is synthesized in extra-adrenal tissues ; both blood vessels and brain. We undertook this study to determine whether the rat heart produces aldosterone and to investigate the effects of adrenalectomy, angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibition, and angiotensin II on aldosterone *nthesis in the heart. To clarify the pathophysiologic role of cardiac aldosterone in the hypertentsive heart, we compared the synthesis of aldosterone in the hearts of stroke-prone spontaneously hypertensive rats (SHRSP) with those in Wistar-Kyoto rats. The effects of the aldosterone antagonist spironolactone on myocardial hypertrophy in adrenalectomized SHRSP were also studied. Isolated rat hearts were perfused for 2 hr, and the perfusate analyzed by high-performance liquid chromatography and mass spectrometry. The activity of aldosterone synthase was estimated by the conversion of [^<14>C] deoxycorticosterone to [^<14>C] aldosterone. The levels of aldosterone synthase gene (CYP11B2) mRNA were determined by competitive polymerase chain reaction. Aldosterone production, the activity of aldosterone synthase, and the expression of CYP11B2 mRNA were increased in hearts from adrenalectomized rats and rats treated with angiotensin II.ACE inhibitors decreased cardiac aldosterone synthesis. Cardiac aldosterone, aldosterone synthase activity and CYP11B2 mRNA levels in hearts from 2- and 4-week-old SHRSP were significantly greater than those of age-matched WKY rats. Spironolactone prevented cardiac hypertrophy in adrenalectomized SHRSP.These results suggest that the rat heart produces aldosterone and endogenous cardiac aldosterone may affect cardiac function and hypertrophy in hypertension in rats.
研究課題/領域番号:11838003, 研究期間(年度):1999-2000
出典：「心筋細胞におけるステロイドホルモン合成酵素の解明及びその病態生理学的意義」研究成果報告書　課題番号11838003 (KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）)　　　本文データは著者版報告書より作成
DOI: 10.24517/00053192
Source: https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=46865&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=46865&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
Access Restrictions: 限定公開
Rights (production): CC BY-NC-ND
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https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11838003/
https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-11838003/118380032000kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA