Gene Gunを用いた生体神経細胞内への持続的薬剤投与実験系の確立

Material type: 文書・図像類

Author: 橋本, 浩一ほか

Publisher: -

Publication date: 2016-04-21

Material Format: Digital

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Note (General)：: 金沢大学医薬保健研究域医学系神経系の発達過程に関与する分子機構を解明するためには、ある特定の分子機構をある程度長期にわたって実験操作することが必要であり、生きている動物でおこなうには難しい点がある。そこで我々は、Gene Gunを用いて、生きている動物の神経細胞内に機能分子を阻害、修飾する分子を効率...

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Material Type: 文書・図像類
Title: Gene Gunを用いた生体神経細胞内への持続的薬剤投与実験系の確立
Author/Editor: 橋本, 浩一
Hashimoto, Kouichi
Author Heading: 橋本, 浩一
Hashimoto, Kouichi
Publication Date: 2016-04-21
Publication Date (W3CDTF): 2016-04-21
Periodical title: 平成16(2004)年度科学研究費補助金萌芽研究研究概要 = 2004 Research Project Summary
No. or year of volume/issue: 2003 – 2004
Volume: 2003 – 2004
Pages: 2p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: プルキンエ細胞
小脳
Gene Gun
発達
Target Audience: 一般
Note (General): 金沢大学医薬保健研究域医学系
神経系の発達過程に関与する分子機構を解明するためには、ある特定の分子機構をある程度長期にわたって実験操作することが必要であり、生きている動物でおこなうには難しい点がある。そこで我々は、Gene Gunを用いて、生きている動物の神経細胞内に機能分子を阻害、修飾する分子を効率的に打ち込むことが出来る実験系を確立したいと考えた。実験の結果、生体動物細胞にGene Gunを用いて試薬を打ち込むことは可能ではあるが、我々が意図した実験に適用するためにはいくつか問題があることが明らかになった。1、Gene Gunによる蛍光染料の生体細胞内への投与昨年度成功した生体の脳への蛍光染料の打ち込み方法の改良を行った。ヘリウムガスの圧力が100psiでは金粒子が軟膜表面を通過できない確率が高く、300psiでは白質にまで到達するので、その間で打ち込み圧を調整する必要があることが分かった。また、蛍光染料をまぶした金粒子をそのまま射出すると、金粒子がいくつか結合して細胞体よりも大きな塊となり組織の障害や非選択的な染色の原因となるが、脳組織とGene Gun本体の間にフィルターをかますことで軽減できることが分かった。2、実験に適用する際の問題点電気生理学的実験を行うために、生体脳に蛍光染料を打ち込んだのち一定期間の後スライスにして観察したところ、実験可能なスライス表面に生存しているプルキンエ細胞の数がほとんどいない傾向があった。染色されていても、スライス表面から深いところに存在している例が多かった。これは恐らく染色されている細胞の密度が低すぎてスライス表面で運良く生き残る細胞数が極端に少なくなるためであると考えられる。この点が改善されないと、我々の実験への適用は難しいと思われる。
研究課題/領域番号:15650057, 研究期間(年度):2003 – 2004
出典：「Gene Gunを用いた生体神経細胞内への持続的薬剤投与実験系の確立」研究成果報告書　課題番号15650057（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-15650057/)を加工して作成
DOI: 10.24517/00060435
Access Restrictions: 限定公開
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Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA