EBウイルス潜在膜蛋白-1による線維芽細胞増殖因子-2分泌促進機構に関する研究

Material type: 文書・図像類

Author: 脇坂, 尚宏ほか

Publisher: -

Publication date: 2010-02-03

Material Format: Digital

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Note (General)：: 金沢大学附属病院平成17年度1.EBV LMP1は細胞内FGF-2蛋白の局在を変える作用がある。LMP1を発現させた上皮細胞ではFGF-2蛋白が増加し、核および核周辺に局在するだけでなく、細胞質、特に細胞末端部に多く発現を認める様になった。2.FGF-2蛋白とLMP1はエンドソーム構造で共局在する。...

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Material Type: 文書・図像類
Title: EBウイルス潜在膜蛋白-1による線維芽細胞増殖因子-2分泌促進機構に関する研究
Author/Editor: 脇坂, 尚宏
Wakisaka, Naohiro
Author Heading: 脇坂, 尚宏
Wakisaka, Naohiro
Publication Date: 2010-02-03
Publication Date (W3CDTF): 2010-02-03
Alternative Title: Research on the mechanism of EBVLMP1-indused release of fibroblast growth factor2
Periodical title: 平成19(2007)年度科学研究費補助金基盤研究(C) 研究成果報告書概要 = 2007 Fiscal Year Final Research Report Summary
No. or year of volume/issue: 2005 – 2007
Volume: 2005 – 2007
Pages: 3p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: EBV
LMP1
FGF-2
エクソソーム
多小胞体
エンドソーム
ライソソーム
共局在
exosome
multivesicular body
endosome
lvsosome
colocalization
Target Audience: 一般
Note (General): 金沢大学附属病院
平成17年度1.EBV LMP1は細胞内FGF-2蛋白の局在を変える作用がある。LMP1を発現させた上皮細胞ではFGF-2蛋白が増加し、核および核周辺に局在するだけでなく、細胞質、特に細胞末端部に多く発現を認める様になった。2.FGF-2蛋白とLMP1はエンドソーム構造で共局在する。LMP1とFLAG標識-FGF-2蛋白を強制発現させたものでは、細胞質および細胞膜下に点状に共局在する事が判明した。3.18-kDa型FGF-2蛋白はエクソソーム内に存在する。ウエスターンブロット法によりエクソソーム内に18-kDa型FGF-2蛋白が存在する事を確認した。4.共局在するLMP1および18kDa型FGF-2は、エクソソームを経由して細胞外に分泌される。エクソソームに含まれると想定されたLMP1および18kDa型FGF-2を異なった大きさの金粒子で標識し、電子顕微鏡的に局在を調べた。その結果、いずれの蛋白もエクソソーム内で共局在することが判明した。5.LMP1ほエクソソームの細胞外放出を促進する。LMP1陽性細胞から採取した培養液では、HSC70が増加しており、LMP1はエクソソームそのものの放出を促進する可能性が示唆された。LMP1がエクソソームの分泌増かを介して、間接的に18kDa-FGF-2蛋白の分泌を促進している可能性が示唆された。成18年度以降1.LMP1によるFGF-2分泌促進機構におけるNa/K-ATPaseの役割に関する検討。LMP1陽性細胞ではNa/K-ATPaseがLMP1およびFGF-2と共局在することが判明した。2.FGF-2を含有するエクソソームが血管新生能を有するか否かに関する検討。血管新生能についてはHUVECによるBrdU取り込み能により評価した。その結果、BrdU取り込み能はエクソソーム振り掛けによる刺激により増強された
Fibroblast growth factor (FGF)-2, a potent angiogenic factor that is involved in tumor invasion and angiogenesis, is known to be released extracellularly by a non-classical secretory pathway. Recently it has become clear that Epstein-Barrvirus, specifically its oncoprotein LMP1, can induce expression of angiogenic factors. Among these factors is FGF-2. LMP1 not only promotes expression of FGF-2, but also the release extracellularly of its 18-kDa isoform. We analyzed the mechanism of FGF-2 release induced by LMP1. Confocal immunofluorescence microscopy revealed colocalization of FGF-2 with LMP1 in small dots also stained positively for CD63 and cathepsin.D, markers of late endosomes or multivesicular bodies. Biochemical analysis and immunoelectron microscopy of purified exosomal fractions from cotransfected cells demonstrated increased release of exosomes and the concentration of LMP I and FGF-2 in these structures. Moreover, cotransfection appeared to induce partial redistribution of the Na/K-ATPase, which participates in FGF-2 release, from the plasma membrane to the intracellular LMPI/FGF-2 positive dots. Treatment with ouabain, which inhibits Na/K-ATPage activity, partially suppressed FGF-2 secretion via exosomes in a dose-dependent manner. The results suggest that exosomes may represent a previously unrecognized mechanism for FGF-2 release mediated by LMP1, and that this pathway, at least in part, involves the activity of Na/K-ATPase.
研究課題/領域番号:17591780, 研究期間(年度):2006 – 2007
出典：「EBウイルス潜在膜蛋白-1による線維芽細胞増殖因子-2分泌促進機構に関する研究」研究成果報告書　課題番号17591780（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/report/KAKENHI-PROJECT-17591780/175917802007kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/)を加工して作成
DOI: 10.24517/00061842
Source: https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=55567&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=55567&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
Access Restrictions: 限定公開
Rights (production): CC BY-NC-ND
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https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-17591780/
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Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA