(6-4)光産物からデュワー産物への異性化を指標とした太陽光紫外線線量計の開発

Material type: 文書・図像類

Author: 二階堂, 修ほか

Publisher: -

Publication date: 2003-09-16

Material Format: Digital

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Note (General)：: 金沢大学薬学部デュワー型光産物(DwP)は太陽光紫外線で誘発される二量体型損傷の一つであり、(6-4)光産物(64P)から太陽光紫外線に含まれる320nm前後の紫外線によって光異性化されて二次的に生じる。DwPは太陽光紫外線により細胞DNAに蓄積し、長く残存するためその変異原性が高いとされている。ヒ...

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Material Type: 文書・図像類
Title: (6-4)光産物からデュワー産物への異性化を指標とした太陽光紫外線線量計の開発
Author/Editor: 二階堂, 修
Nikaido, Osamu
Author Heading: 二階堂, 修
Nikaido, Osamu
Publication Date: 2003-09-16
Publication Date (W3CDTF): 2003-09-16
Alternative Title: Establishment of a solar UV dosimeter based on the photoisomerization of (6-4)photoproducts to the Dewar isomers.
Periodical title: 平成13(2001)年度科学研究費補助金基盤研究(B) 研究概要 = 2001 Research Project Summary
No. or year of volume/issue: 2000 – 2001
Volume: 2000 – 2001
Pages: 3p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: 損傷認識モノクローナル抗体
デュワー型光産物
ドットブロット解析
酵素標識免疫測定法(ELISA)
太陽光紫外線
UVB-UVA
UVC
リスク推定
酸素標識免疫測定法(ELISA)
ECL(化学発光増感)法
DNA damage
cyclobutane pyrimidine dimer (CPD)
(6-4)photoproduct
immuno-dot-blot (IDB)
risk assessment
Dewar photoproduct
monoclonal antibody
photoisomerization
Target Audience: 一般
Note (General): 金沢大学薬学部
デュワー型光産物(DwP)は太陽光紫外線で誘発される二量体型損傷の一つであり、(6-4)光産物(64P)から太陽光紫外線に含まれる320nm前後の紫外線によって光異性化されて二次的に生じる。DwPは太陽光紫外線により細胞DNAに蓄積し、長く残存するためその変異原性が高いとされている。ヒトにおいてDwPに起因するリスクの推定には太陽光紫外線中に含まれる320nm付近の波長域の線量測定が必要である.しかし当該波長域(UVB-UVA境界域)の紫外線線量を測定する既存の機器は測定波長域の狭間にあるため無きに等しいのが現状である。従って本研究で開発する新しい太陽光紫外線線量計のリスク推定への寄与は大きいものと考えられる。1.64Pの光異性化の波長依存症の検討予め100J/m^2のUVCを勝者して64Pを誘発させておいたDNAに、国立岡崎共同研究機構・基礎生物学研究所に設置されている大型スペクトルグラフ装置(OLS)を用いて種々の波長の単色光紫外線を照射した。照射されたDNA標品を一本鎖化後、酵素標識免疫測定法(ELISA)にてDNA中の64P並びにDwPを測定した。64Pの測定には64M-2抗体を、DwP検出にはDEM-1抗体を一次抗体として用い検出した。その結果、DNA中に残存する64P量が低下するにつれてDwP量が増加する結果を得た。DwPの特異的誘発ピークは320nmにあり、64Pの示す特異的吸収波長に一致した。2.免疫ドットプロット法(IDB)を利用した定量的損傷検出系(太陽光紫外線線量計)の樹立Calf thymus DNAに100J/m^2のUVCを照射後、ナイロン膜(ロッシュ)にブロットし、フィルムバッジ様の太陽光受光器を製作した。次いでマイラーフイルターで300nm以下の波長をカットしたUVBランプ(東芝・FL-20SE)で種々の線量を照射した。線量測定には英弘精機のMI-2101を用いた。UVBを照射後、DwPを認識するDEM-1抗体でフイルターを処理し、アルカリフォスファターゼ標識ヤギ抗マウス抗体で2時間インキュペートした.次にCDP-star(ロッシュ)を滴下して発色させた。ナイロン膜上の化学発光シグナルは富士フィルムのLAS1000で撮影して画像解析し、Science Lab 98-Image Guageversion 3によりバンド強度(band intensity)を定量化した.その結果、UVB照射線量に依存してバンド強度は直線的に増加することが明らかになった。3.フィルムバッジ型測定器の屋外試験上記のフィルムバッジ型受光器は軽量で携帯に便である。しかし曝露される線量が高すぎると累積線量が正しく示さない可能性があるため、特異的波長吸収を示さないブルーポリェチレンフィルターをフィルムにかぶせることにより線量率を低下させることに成功した。その結果、金沢における日照量の最高日(初夏から夏にかけて)の紫外線線量に匹敵する線量をも正確に測ることが可能となった。
We established a solar UV dosimeter measuring the UV inteiasiiy of wavelengths ranging from 300 to 340 nm.The solar UV, especially UVB(290-320nm)induces cyclobutane pyrimidine dimers(CPD)and(6-4)photoproduct(64P) in cellular DNA. Furthemore, the UV wavelengths ranging from 300 to 340 nm in solar light are known to efficiently photoisomerize 64P to its Dewar isomer(DwP). The latter is said to be highly mutagenic. Thus, we need to establish a dosimeter measuring the accumulation of the DwP in DNA for the risk assessment of solar UV. However, none of dosimeters measuring the wavelengths from 300 to 340 nm has been established so far. To establish a new UV dosimeter, we carried out the experiments nmentioned below,1) We blotted the DNA irradiated with 100 J/m^2 of UVC on a nylon membrane. The membrane was then exposed to various doses of monochromatic UV light from the Okazaki Large Spectrograph. After exposure, the membrane was treated with DEM-1 antibody immnohisitochemically and the color intensity was assayed (immuno-dot-blot : IDB). The results obtained so far revealed the photoisomerization of DwP from 64P efficiently occurs at 320 nm.2) By using the same method (IDB), we measured the UV doses from 300 to 340 nm emitted from the Mylar-filtered UVB lamp (Toshiba FL-20SE). The color intensity of the blotted DNA on the nylon membrane increased lmearly with increasing dosed of UVB. Thus, we succeeded to produce a new solar UV dosimeter measuring the wavelengths from 300 to 340 nm.
研究課題/領域番号:12558059, 研究期間(年度):2000 – 2001
出典：「(6-4)光産物からデュワー産物への異性化を指標とした太陽光紫外線線量計の開発」研究成果報告書　課題番号12558059（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-12558059/）を加工して作成
DOI: 10.24517/00063530
Source: https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=57260&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=57260&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
Access Restrictions: 限定公開
Rights (production): CC BY-NC-ND
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https://kaken.nii.ac.jp/ja/grant/KAKENHI-PROJECT-12558059/
Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA