細胞核と細胞質間の輸送の分子機構: インフルエンザウイルスによる研究

Material type: 文書・図像類

Author: 福田, 龍二ほか

Publisher: -

Publication date: 1996-04-14

Material Format: Digital

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Note (General)：: 金沢大学医薬保健研究域医学系核と細胞質間の高分子物質の輸送機構の研究で、インフルエンザウイルスの増殖過程は幾つかの興味ある問題を提起している。(1)核内で複製したゲノムRNA・蛋白質複合体(vRNA)がウイルス粒子形成のために核孔から細胞質へと搬出される過程で、ウイルス粒子被覆蛋白質、M1蛋白質が関...

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Material Type: 文書・図像類
Title: 細胞核と細胞質間の輸送の分子機構: インフルエンザウイルスによる研究
Author/Editor: 福田, 龍二
Fukuda, Ryuji
Author Heading: 福田, 龍二
Fukuda, Ryuji
Publication Date: 1996-04-14
Publication Date (W3CDTF): 1996-04-14
Alternative Title: Studies on the mechanism of nuclear-cytoplasmic transport -From the studies of the influenza virus assembly
Periodical title: 平成6(1994)年度科学研究費補助金一般研究(C) 研究成果報告書概要 = 1994 Fiscal Year Final Research Report Summary
No. or year of volume/issue: 1993-1994
Volume: 1993-1994
Pages: 2p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: 核・細胞質間輸送
インフルエンザウイルス
核孔
核小体
M1蛋白質
NA蛋白質
NS1蛋白質
ウイルス粒子形成
Nuclear-cytoplasmic Transport
Influenza Virus
Nuclear Pore
M1 Protein
NA Protein
Virus Assembly
Reverse Genetics
Target Audience: 一般
Note (General): 金沢大学医薬保健研究域医学系
核と細胞質間の高分子物質の輸送機構の研究で、インフルエンザウイルスの増殖過程は幾つかの興味ある問題を提起している。(1)核内で複製したゲノムRNA・蛋白質複合体(vRNA)がウイルス粒子形成のために核孔から細胞質へと搬出される過程で、ウイルス粒子被覆蛋白質、M1蛋白質が関与することを明かとした。その分子機構を知る為に、tsM1変異株の解析を行ない新しい知見を得た。すなわち感染時間をこれまでよりも長くするとvRNPがM1蛋白質を伴うことなく細胞質へと輸送されることである。したがってM1が輸送のシャペロンとして働くというこれまでのモデルの修正が必要となり、それを検証する実験を行なっている。(2)核から細胞質へ搬出されたvRNPがウイルス粒子形成の次の段階で、細胞質でどの様な形態で存在するかは新しいモデルの検証に重要であると考えられた。ウイルス膜糖蛋白質NAの細胞質ドメインとそれに続く膜貫通ドメインの一部のアミノ酸配列は亜型間で良く保存されており、ウイルス粒子形成過程で重要な役割を持つと推測された。これらのドメインの種々の人工変異株ウイルスの回収をトランスフェクション実験で調べ、vRNPがこの領域と相互作用しM1がその仲介をする可能性が示めされた。またNAのこの領域の高次構造が重要であると考えられた。(3)ウイルスNS1蛋白質の核への搬入において核小体がはたす役割を調べ、NS1がリボソームRNAの特定の配列に強く結合することを明らかとした。また搬入の時間経過を調べ、NS1はまず核小体に分布し、その後核質中に展開することを明らかとした。すなわち搬入を仲介するシャペロンと共に核孔を通過したNS1は、まず核小体に入り、リボソームRNAに結合することによりシヤシャペロンを遊離し、その後核質中に入る経路が示唆された。このシャペロンの同定のためにTwo Hybrid System法とFar Western法でそのcDNAの分離を試みている。
We have realized that the studies of the influenza virus growth provide several interesting problems concerning nuclear-cytoplasmic transport. In the early stage of virus assembly, the virus genomic RNA produced in the nucleus immediately with virus core proteins, and the ribonucleoprotein complex (vRNP) thus formed is transported through the nuclear pore into the cytosol, and then into budding virus particles on the plasma membrane. In the first part of this study, nuclear-cytoplasmic transport of vRNPs was studied by analysing the distribution of vRNAs employing an in situ hybridization technique. The analyzes were performed using wild-type virus as well as a ts mutant virus, ts-51, which harbors a mutation in the segment 7, and has a defect in the late phase of virus growth. Nucleotide sequence analysis revealed a single amino acid change in the M1 protein. In the ts-51 virus-infected cells at a nonpermissive temperature, more than 95% of the vRNAs and the M1 protein remained in the nucleus, even at 6 hrpi and thereafter, when about 50% of them moved to the cytoplasm for the wild-type virus.These observations indicated that the M1 protein participated in the nuclear-cytoplasmic transport of the vRNAs. One hypothesis was that the M1 was associated with vRNPs in the nucleus forming possible M1-vRNP complexes, which were then transported into the cytosol. In the second part of this study, the virus assembly process in plasma membrane was investigated on the significance of the conserved sequence of the NA protein (its cytoplasmic domain and a successive sequence of the transmembrane domain) by the reverse genetic technique. It was indicated that both successive regions playd important roles in the formation of the infective virus particles.
研究課題/領域番号:05680589, 研究期間(年度):1993-1994
出典：研究課題「細胞核と細胞質間の輸送の分子機構: インフルエンザウイルスによる研究」課題番号05680589（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-05680589/056805891994kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作成
DOI: 10.24517/00056885
Source: https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=50576&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=50576&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
Access Restrictions: 限定公開
Rights (production): CC BY-NC-ND
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https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05680589/
https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-05680589/056805891994kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA