食中毒・環境由来神経毒素原性ブチリクム菌の毒素学的,遺伝学的,生理学的性状の解析

Material type: 文書・図像類

Author: 中村, 信一ほか

Publisher: -

Publication date: 2001-10-22

Material Format: Digital

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Note (General)：: 金沢大学大学院医学系研究科1.遺伝学的・生理学的解析(1)中国食中毒由来6株、微山湖土壌由来5株、イタリア乳児ボツリヌス症由来2株を用いて、random amplified polymorphic DNA,パルスフィールドゲル電気泳動および神経毒素遺伝子プローブによるサザンブロッティングの3手法によ...

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Material Type: 文書・図像類
Title: 食中毒・環境由来神経毒素原性ブチリクム菌の毒素学的,遺伝学的,生理学的性状の解析
Author/Editor: 中村, 信一
Nakamura, Shinichi
Author Heading: 中村, 信一
Nakamura, Shinichi
Publication Date: 2001-10-22
Publication Date (W3CDTF): 2001-10-22
Alternative Title: Toxicological, Genetic and Physiological analyses of neurotoxigenic Clostridium butyricum from food-borne botulism and environment origins
Periodical title: 平成11(1999)年度科学研究費補助金基盤研究(C) 研究成果報告書概要 = 1999 Fiscal Year Final Research Report Summary
No. or year of volume/issue: 1998-1999
Volume: 1998-1999
Pages: 2p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: 神経毒素産生性ブチリクム菌
塩基配列
ボツリヌス菌
E型ボツリヌス毒素
毒素活性化
致死毒性
乳児ボツリヌス症
食餌性ボツリヌス中毒
Neurotoxigenic Clostridium butyricum
Nucleotide sequence
Clostridium botulinum
Type E botulinum toxin
Activation of toxin
Lethality
Infant botulism
Food-borne botulism
Target Audience: 一般
Note (General): 金沢大学大学院医学系研究科
1.遺伝学的・生理学的解析(1)中国食中毒由来6株、微山湖土壌由来5株、イタリア乳児ボツリヌス症由来2株を用いて、random amplified polymorphic DNA,パルスフィールドゲル電気泳動および神経毒素遺伝子プローブによるサザンブロッティングの3手法により分子疫学解析を行った。いずれの手法においても、イタリア由来株、中国食中毒由来株、微山湖由来株の3つのクラスターに分別された。これはアラビノースとイヌリンの分解性状の差異とも一致した。(2)中国由来11株とイタリア由来1株の神経毒素遺伝子全塩基配列を決定した。中国由来11株の塩基配列は同一であり、アミノ酸相同性はイタリア由来と95.0%、ボツリヌス菌由来と96.9%であった。2.毒素学的解析重鎖を認識する4種の抗イタリア由来BL5262株毒素モノクローナル抗体(mAb)全てが中国食中毒由来KZ1885株毒素に反応しなかった。抗ボツリヌス菌E型毒素mAb 7種(軽鎖認識4種、重鎖認識3種)の内、重鎖認識1種を除いた全てがKZ1885毒素と反応した。ペプチドマッピングでは、KZ1885毒素とE型毒素は、軽鎖が同一パターン、重鎖に部分的差異を示し、BL5262は2つの毒素とは異なることが示唆された。最終的に毒素遺伝子の塩基配列の決定によりに(1の(2))、KZ1885毒素とE型毒素は軽鎖が同一であり重鎖C末端領域が部分的に異なることが確認された。KZ1885毒素はトリプシンにより活性化を受けるが、比活性はE型毒素、BL5262毒素より約15倍低かった。3.まとめ(1)特定の神経毒素産生性ブチリクム菌が、それぞれ特定の広範な地域に分布している。(2)分子構造および抗原性において、中国由来神経毒素は、同一金種(ブチリクム菌)から産生されるイタリア由来神経毒素よりボツリヌス菌E型神経毒素に近い。
1. Genetic and physiological analyses(1) Six strains derived from food-borne botulism cases in China, five strains from soil of Weishan lake area, China, and two strains from infant botulism cases in Italy were analyzed with random amplified polymorphic DNA assay, pulsed-field gel electrophoresis, and Southern blot hybridization for the toxin gene. Test strains were divided into three clusters in accordance with the origin. This typing agreed to fermentation patterns of arabinose and inulin.(2) Nucleotide sequences of the toxin gene of eleven Chinese strains and a Italian strain were determined. Nucleotide sequences of the toxin gene of eleven Chinese strains were identical. The amino acid identity between Chinese and Italian strains was 95.0% and that between Chinese strains and C. botulinum type E was 96.9%.2. Toxicological analysisThere is antigenical diversity between C. butyricum neurotoxins from an Italian strain (BL5262) and from a Chinese strain from food-borne botulism (KZ1885 ). ELISA and immunoblotting analyses with the monoclonal antibodies (mAbs) against C. botulinum type E neurotoxin and BL5262 neurotoxin indicated that the light chain of KZ1885 neurotoxin possesses the same antigenical characteristics as that of type E neurotoxin, while the heavy chain shares partially antigenically different portion. The mAbs reacting specifically to BL5262 neurotoxin heavy chain hardly recognized KZ1885 neurotoxin. These observations was also confirmed by nucleotide sequencing. Furthermore, the difference of amino acid sequences between KZ1885 and type E neurotoxins appeared to be concentrated at the carboxyl-terminal portion of the heavy chain. The specific toxicity of KZ1885 neurotoxin was about 15 times lower than that of type E neurotoxin.3. Conclusion(1) It is likely that neurotoxigenic C. butyricum are clonally distributed over each vast area.(2) C. butyricum KZ1885 neurotoxin is structurally, antigenically much similar to C. botulinum type E neurotoxin, in comparison with C. butyricum BL5262 neurotoxin.
研究課題/領域番号:10670251, 研究期間(年度):1998-1999
出典：研究課題「食中毒・環境由来神経毒素原性ブチリクム菌の毒素学的,遺伝学的,生理学的性状の解析」課題番号10670251（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-10670251/106702511999kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作成
DOI: 10.24517/00056894
Source: https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=50585&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=50585&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
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Rights (production): CC BY-NC-ND
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https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10670251/
https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-10670251/106702511999kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA