ビタミンD_3代謝物を指標とする骨粗しょう症用臨床診断薬の開発

• Material Type: 文書・図像類
• Title: ビタミンD_3代謝物を指標とする骨粗しょう症用臨床診断薬の開発
• Author/Editor: 島田, 和武; Shimada, Kazutake
• Author Heading: 島田, 和武; Shimada, Kazutake
• Publication Date: 1999-03-08
• Publication Date (W3CDTF): 1999-03-08
• Alternative Title: Development of Diagnostic Reagent for Osteoporosis with Guidance of Vitamin D Metabolites
• Periodical title: 平成8(1996)年度 科学研究費補助金 基盤研究(B) 研究成果報告書概要 = 1996 Fiscal Year Final Research Report Summary
• No. or year of volume/issue: 1995-1996
• Volume: 1995-1996
• Pages: 3p.-
• Text Language Code: jpn
• Subject Heading: 活性化ビタミンD_3; 骨粗しょう症; [C-11 α]ハプテン; ポリクローナル抗体; モノクローナル抗体; イムノアフィニティクマトグラフィー; ラジオレセプターアッセイ; キツト化; active form of vitamin D_3; osteoporosis; [C-11 alpha] hapten; polyclonal antidody; monoclonal antibody; immunoaffinity chromatography; radioreceptor assay; kit
• Target Audience: 一般
• Note (General): 金沢大学自然科学研究科薬学系; ヒト血液中の活性型ビタミンD_3〔1,25(OH)_2D_3〕を測定することは,骨粗しょう症の確定診断上で極めて有用である.現在,その測定は主としてradioreceptor assay (RRA)により行われているが煩雑な前処理を必要とするなど種々の問題を有している.そこで,我々はその解決にimmunoaffinity chromatography (IAC)を導入した.まず,固定化に用いるligandとして測定対象に極めて特異性の高い抗体の調製を企てた.すなわち,従来から抗D_3代謝物抗体の調製は種々試みられているものの,いずれも化合物自身の有する官能基を利用して蛋白質と結合させたハプテン-蛋白質結合体を免疫原としたものである.そのため,得られる抗体の特異性が低く,診断薬等への適用は困難であった.我々は,D_3代謝物に特徴的な官能基と離れた11位に着目し,約20工程を経てここを結合部位とする免疫原([C-11α]ハプテン)の合成,さらにこれを用いて極めて特異性の高いポリクローナル抗体の調製に成功した.本抗体は従来の抗体のみならず,汎用されているレセプターの特異性をも凌駕する優れたものであり,本抗体をligandとしたIACは十分満足し得るものであつた.さらに,開発したIAC/RRAシステムを実試料へ適用しその有用性を明らかとした.また,本免疫原を用いほぼ同様の性質を有するモノクローナル抗体の産生にも成功しており,これにより品質一定のligandを有するIACをほぼ半永久的に供給でき,キット化された骨粗しょう症診断薬への途も拓かれた.これらとは別に,HPLCによるD_3代謝物分析法の開発も企て,ヒト血中における25(OH)D_33-sulfateの存在を明らかとすると共に定量法を開発するなど優れた成果を挙げた.; 1 alpha, 25-Dihydroxyvitamin D_3 [1,25 (OH) _2D_3] is the hormonally active form of vitamin D_3 which plays an important role in regulating calcium and phosphorus metabolism and bone resorption.. The measurement of 1,25 (OH) _2D_3 levels in human serum/plasma is of great value for clinical diagnosis, such as osteoporosis. Conventionally, receptor assays (RRAs) based on vitamin D receptor have been the main method for determining the 1,25 (OH) _2D_3 levels. However, these methods required exhaustive purification steps of the biological samples including preparative HPLC.A selective and simple immunoaffinity chromatography (IAC) has been developed and found to be useful pretreatment tool for determining 1,25 (OH) _2D_3 in human plasma. A reasonably designed haptenic derivatives, 11 alpha-hemiglutaryloxy-1,25 (OH) _2D_3, was linked to bovine serum albumin, and rabbits were immunized with the conjugate. The resulting polyclonal antibodies were specific to 1,25 (OH) _2D_3, recognizing both the A-ring and the side-chain structures. The antibodies were then immobilized on agarose gel and used as an IAC which enabled a simple RRA assay for human plasma 1,25 (OH) _2D_3. The satisfactory monoclonal antibodies have also been produced against the haptenic derivatives, which will be applicable for developing IAC.The determination methods for the conjugated metabolites of vitamin D using HPLC have also been developed.; 研究課題/領域番号:07557293, 研究期間(年度):1995-1996; 出典：研究課題「ビタミンD_3代謝物を指標とする骨粗しょう症用臨床診断薬の開発」課題番号07557293（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-07557293/075572931996kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/）を加工して作成
• DOI: 10.24517/00057189
• Access Restrictions: 限定公開
• Related Material: https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=90004605; https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07557293/; https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-07557293/075572931996kenkyu_seika_hokoku_gaiyo/
• Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）; https://irdb.nii.ac.jp
• Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA