癌の転移・浸潤に関わる膜結合型マトリックスメタロプロティナーゼの構造と機能解析

Material type: 文書・図像類

Author: 佐藤, 博ほか

Publisher: -

Publication date: 2016-04-21

Material Format: Digital

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Note (General)：: 金沢大学がん研究所高転移性癌組織においてMMPによる組織破壊活性が高いことが知られている。我々は癌組織における特異的なゼラチナーゼA活性化に注目し、ゼラチナーゼA活性化に関わる遺伝子としてMT‐MMPをクローニングした。本研究ではMT‐MMPの構造と機能を解析すると共にMT‐MMPを標的とした抗癌、...

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Material Type: 文書・図像類
Title: 癌の転移・浸潤に関わる膜結合型マトリックスメタロプロティナーゼの構造と機能解析
Author/Editor: 佐藤, 博
Sato, Hiroshi
Author Heading: 佐藤, 博
Sato, Hiroshi
Publication Date: 2016-04-21
Publication Date (W3CDTF): 2016-04-21
Periodical title: 平成7(1995)年度科学研究費補助金重点領域研究研究概要 = 1995 Research Project Summary
No. or year of volume/issue: 1995
Volume: 1995
Pages: 2p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: 転移
浸潤
マトリックスメタロプロテイナーゼ
ゼラチナーゼA
Target Audience: 一般
Note (General): 金沢大学がん研究所
高転移性癌組織においてMMPによる組織破壊活性が高いことが知られている。我々は癌組織における特異的なゼラチナーゼA活性化に注目し、ゼラチナーゼA活性化に関わる遺伝子としてMT‐MMPをクローニングした。本研究ではMT‐MMPの構造と機能を解析すると共にMT‐MMPを標的とした抗癌、抗転移剤開発のためのスクリーニング系を開発する事を目的とした。癌組織においてはゼラチナーゼA活性化と共に活性化型ゼラチナーゼAの癌細胞への特異的な結合が認められることからMT‐MMPのゼラチナーゼAレセプターとしての機能を検討した。I‐125‐標識ゼラチナーゼAとMT‐MMP発現プラスミド導入細胞をインキュベイトし、細胞への結合、活性化をSDS‐PAGEにより分析した結果、ゼラチナーゼAはMT‐MMP発現細胞に特異的に結合し、引き続き中間体まで変換される事が明らかとなった。中間体から活性化型まではゼラチナーゼA自身の酵素活性を必要とすることから自己触媒的に変換されることが示唆された。一方で、リコンビナントMT‐MMPタンパクによるゼラチナーゼA活性化反応の再構成実験を試みた。MT‐MMPのキャタリティックドメインをグルタチオンSトランスフェラーゼとの融合タンパクとして大腸菌で発現させグルタチオンビーズゲルにより精製した。精製MT‐MMP融合タンパクをゼラチナーゼAとインキュベイトしその後ゼラチンザイモグラフィーにより分析した。その結果MT‐MMP融合タンパクによってゼラチナーゼAの特異的なプロセッシングが認められた。ゼラチナーゼAのAsn66‐LeuをIle‐Valに変換した変異体ではプロセッシングが起こらず、この部位で切断が起こることが示唆された。融合タンパクによるプロセッシングはMMPの特異的な阻害剤であるTIMP‐2,BB‐94により顕著に抑制されたことから、この系が阻害剤スクリーニングに有用であることが示された。
研究課題/領域番号:07273225, 研究期間(年度):1995
出典：研究課題「癌の転移・浸潤に関わる膜結合型マトリックスメタロプロティナーゼの構造と機能解析」課題番号07273225（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07273225/）を加工して作成
DOI: 10.24517/00066205
Source: https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=59954&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
https://kanazawa-u.repo.nii.ac.jp/?action=repository_action_common_download&item_id=59954&item_no=1&attribute_id=26&file_no=1
Access Restrictions: 限定公開
Rights (production): CC BY-NC-ND
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https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07273225/
Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA