並列タイトル等Construction of a novel celluloysis system utilizing Tetrahymena
タイトル（掲載誌）平成29(2017)年度 科学研究費補助金 挑戦的萌芽研究 研究成果報告書 = 2017 Fiscal Year Final Research Report
一般注記金沢大学理工研究域生命理工学系
テトラヒメナを用いて外来遺伝子の発現ベクターの開発・改良を行った。このベクターは、１）耐性遺伝子の入ったスクリーニング用カセット、２）システインプロテアーゼの分泌シグナルを組み込んだ発現カセット、３）相同組換えのための導入遺伝子座の周辺配列、からなる。このベクターに、シロアリ腸内共生鞭毛虫由来の４種のセルラーゼ遺伝子の発現誘導・分泌後、セルラーゼ活性を測定した。新ベクターでは、以前のベクターに比べ、EG5、EG7両方で10～50倍程度の活性が検出され。リグニンエステラーゼであるCip2-likeに関して、若干の作用が認められた。CBHについては、これまでのところ活性は検出できていない。
Construction of a novel transformation vector for expressing and secreting foreign cellulase genes in the ciliate Tetrahymena thermopile. This vector consists of 3 separate parts: 1) a cassette carrying drug resistant gene for screening after bombardment, 2) an expression cassette with a secretion signal derived from Tetrahymena cystein protease 4 gene, 3) flanking sequences at both sides of beta-tubulin gene for homologous recombination. Introducing 4 different genes (endoglucanase (EG) 5 and 7, cellobiohydrolase (CBH) and lignin esterase Cip2-like) from the termite symbiotic protists for cellulolysis into the vector, their activities were measured after induction of gene expression and subsequent secretion outside cells, respectively. EG5 and 7 were efficiently expressed, showing strong activity. Lignin esterase Cip2-like activity was slightly detected. No CBH activity has been confirmed, suggesting difficult folding due to the complicated protein structure.
研究課題/領域番号:15K12263, 研究期間(年度):2015-04-01 - 2018-03-31
出典：研究課題「原生生物テトラヒメナによる新規セルロース分解系の構築」課題番号15K12263（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所）） （https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-15K12263/15K12263seika/）を加工して作成
関連情報https://kaken.nii.ac.jp/search/?qm=20272932
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15K12263/
https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-15K12263/15K12263seika/
連携機関・データベース国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）