原生生物テトラヒメナによる新規セルロース分解系の構築

Material type: 文書・図像類

Author: 遠藤, 浩ほか

Publisher: -

Publication date: 2018-05-25

Material Format: Digital

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Note (General)：: 金沢大学理工研究域生命理工学系テトラヒメナを用いて外来遺伝子の発現ベクターの開発・改良を行った。このベクターは、１）耐性遺伝子の入ったスクリーニング用カセット、２）システインプロテアーゼの分泌シグナルを組み込んだ発現カセット、３）相同組換えのための導入遺伝子座の周辺配列、からなる。このベクターに、シ...

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Material Type: 文書・図像類
Title: 原生生物テトラヒメナによる新規セルロース分解系の構築
Author/Editor: 遠藤, 浩
Endoh, Hiroshi
Author Heading: 遠藤, 浩
Endoh, Hiroshi
Publication Date: 2018-05-25
Publication Date (W3CDTF): 2018-05-25
Alternative Title: Construction of a novel celluloysis system utilizing Tetrahymena
Periodical title: 平成29(2017)年度科学研究費補助金挑戦的萌芽研究研究成果報告書 = 2017 Fiscal Year Final Research Report
No. or year of volume/issue: 2015-04-01 - 2018-03-31
Volume: 2015-04-01 - 2018-03-31
Pages: 5p.-
Text Language Code: jpn
Subject Heading: テトラヒメナ
分泌ベクター
シロアリ腸内共生ベン毛虫
エンドグルカナーゼ
セロビオヒドラーゼ
Target Audience: 一般
Note (General): 金沢大学理工研究域生命理工学系
テトラヒメナを用いて外来遺伝子の発現ベクターの開発・改良を行った。このベクターは、１）耐性遺伝子の入ったスクリーニング用カセット、２）システインプロテアーゼの分泌シグナルを組み込んだ発現カセット、３）相同組換えのための導入遺伝子座の周辺配列、からなる。このベクターに、シロアリ腸内共生鞭毛虫由来の４種のセルラーゼ遺伝子の発現誘導・分泌後、セルラーゼ活性を測定した。新ベクターでは、以前のベクターに比べ、EG5、EG7両方で10～50倍程度の活性が検出され。リグニンエステラーゼであるCip2-likeに関して、若干の作用が認められた。CBHについては、これまでのところ活性は検出できていない。
Construction of a novel transformation vector for expressing and secreting foreign cellulase genes in the ciliate Tetrahymena thermopile. This vector consists of 3 separate parts: 1) a cassette carrying drug resistant gene for screening after bombardment, 2) an expression cassette with a secretion signal derived from Tetrahymena cystein protease 4 gene, 3) flanking sequences at both sides of beta-tubulin gene for homologous recombination. Introducing 4 different genes (endoglucanase (EG) 5 and 7, cellobiohydrolase (CBH) and lignin esterase Cip2-like) from the termite symbiotic protists for cellulolysis into the vector, their activities were measured after induction of gene expression and subsequent secretion outside cells, respectively. EG5 and 7 were efficiently expressed, showing strong activity. Lignin esterase Cip2-like activity was slightly detected. No CBH activity has been confirmed, suggesting difficult folding due to the complicated protein structure.
研究課題/領域番号:15K12263, 研究期間(年度):2015-04-01 - 2018-03-31
出典：研究課題「原生生物テトラヒメナによる新規セルロース分解系の構築」課題番号15K12263（KAKEN：科学研究費助成事業データベース（国立情報学研究所））（https://kaken.nii.ac.jp/report/KAKENHI-PROJECT-15K12263/15K12263seika/）を加工して作成
DOI: 10.24517/00052592
Access Restrictions: 限定公開
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Data Provider (Database): 国立情報学研究所 : 学術機関リポジトリデータベース（IRDB）（機関リポジトリ）
https://irdb.nii.ac.jp
Original Data Provider (Database): 金沢大学 : 金沢大学学術情報リポジトリKURA